Elektroforezė: kas tai yra, kam ji skirta ir kaip ji daroma

Turinys

• Kam tai
• Kaip tai daroma
• Elektroforezės tipai
• 1. Hemoglobino elektroforezė
• 2. Baltymų elektroforezė

Elektroforezė yra laboratorinė technika, atliekama siekiant atskirti molekules pagal jų dydį ir elektrinį krūvį, kad būtų galima nustatyti ligų diagnozę, patikrinti baltymų ekspresiją ar nustatyti mikroorganizmus.

Elektroforezė yra paprasta ir nebrangi procedūra, naudojama laboratorijoje ir atliekant mokslinius tyrimus. Pagal elektroforezės tikslą, norint nustatyti, pavyzdžiui, diagnozę gali tekti atlikti kitus tyrimus ir egzaminus.

Kam tai

Elektroforezė gali būti atliekama skirtingais tikslais tiek atliekant mokslinius tyrimus, tiek diagnozuojant, nes tai paprasta ir nebrangi technika.Taigi elektroforezę galima atlikti:

• Nustatykite virusus, grybus, bakterijas ir parazitus, o ši programa dažniau taikoma mokslinių tyrimų projektuose;
• Tėvystės testas;
• Patikrinkite baltymų išraišką;
• Nustatyti mutacijas, kurios yra naudingos, pavyzdžiui, diagnozuojant leukemiją;
• Išanalizuoti cirkuliuojančio hemoglobino tipus, kurie yra naudingi pjautuvinės anemijos diagnozei nustatyti;
• Įvertinkite baltymų kiekį kraujyje.

Atsižvelgiant į elektroforezės tikslą, gali prireikti atlikti kitus papildomus tyrimus, kad gydytojas galėtų diagnozuoti.

Kaip tai daroma

Norint atlikti elektroforezę, reikalingas gelis, kuris gali būti poliakrilamidas arba agarozė, atsižvelgiant į paskirtį, elektroforezės buferis ir talpa, molekulinės masės žymeklis ir fluorescenciniai dažai, be UV arba LED šviesos įrangos, dar vadinamos transiliuminatoriumi.

Paruošus gelį, reikia įdėti konkretų daiktą, kad duobutės būtų padarytos gelyje, liaudyje vadinamos šukomis, ir leistų geliui sustingti. Kai gelis bus paruoštas, tiesiog tepkite medžiagas į duobutes. Tam reikia įdėti molekulinės masės žymeklį į vieną iš duobių, teigiamą kontrolę, kuri yra medžiaga, kuri yra žinoma, kas tai yra, neigiamą kontrolę, kuri garantuoja reakcijos pagrįstumą, ir mėginius, kuriuos reikia analizuoti. Visi mėginiai turi būti sumaišyti su fluorescuojančiais dažais, nes tokiu būdu galima vizualizuoti transiliuminatoriaus juostas.

Gelis su mėginiais turi būti dedamas į elektroforezės talpyklą, kurioje yra specifinis buferinis tirpalas, o tada prietaisas įjungiamas taip, kad būtų elektros srovė ir atitinkamai potencialų skirtumas, kuris yra svarbus atskiriamosioms dalelėms pagal jų savybes. apkrova ir dydis. Elektroforezės veikimo laikas priklauso nuo procedūros tikslo ir gali trukti iki 1 valandos.

Praėjus nurodytam laikui, galima pamatyti elektroforetinio važiavimo per transiliuminatorių rezultatą. Kai gelis dedamas į UV ar LED šviesą, galima vizualizuoti juostų šabloną: kuo didesnė molekulė, tuo mažesnė jos migracija, artėjant prie šulinio, tuo tarpu kuo šviesesnė molekulė, tuo didesnis migracijos potencialas.

Kad reakcija būtų patvirtinta, turi būti vizualizuotos teigiamos kontrolės juostos ir nieko negalima vizualizuoti neigiamoje kontrolėje, nes kitaip tai rodo, kad buvo užteršimas, ir visas procesas turi būti pakartotas.

Elektroforezės tipai

Elektroforezė gali būti atliekama įvairiais tikslais ir, atsižvelgiant į jos paskirtį, gali būti naudojami keli gelio tipai, dažniausiai poliakrilamidas ir agarozė.

Elektroforezė mikroorganizmams nustatyti dažniausiai atliekama tyrimų laboratorijose, tačiau diagnostikos tikslais elektroforezė gali būti naudojama hematologinėms ligoms ir ligoms, kurios vystosi didėjant baltymų kiekiui nustatyti, yra pagrindinės elektroforezės rūšys:

1. Hemoglobino elektroforezė

Hemoglobino elektroforezė yra laboratorinė technika, atliekama siekiant nustatyti įvairius kraujyje cirkuliuojančius hemoglobino tipus, leidžiančius nustatyti su hemoglobino sinteze susijusias ligas. Hemoglobino tipas nustatomas elektroforezės būdu esant tam tikram pH, idealiu atveju - nuo 8,0 iki 9,0, naudojant juostų modelį, kurį galima palyginti su įprastu modeliu, leidžiančiu nustatyti nenormalius hemoglobinus.

Kam jis sukurtas: Hemoglobino elektroforezė atliekama tiriant ir diagnozuojant su hemoglobino sinteze susijusias ligas, tokias kaip pjautuvo ląstelių anemija ir hemoglobino C liga, be to, ji yra naudinga diferencijuojant talasemiją. Sužinokite, kaip interpretuoti hemoglobino elektroforezę.

2. Baltymų elektroforezė

Baltymų elektroforezė yra egzaminas, kurio paprašė gydytojas, kad įvertintų kraujyje cirkuliuojančių baltymų kiekį ir taip nustatytų ligas. Šis tyrimas atliekamas iš kraujo mėginio, kuris centrifuguojamas, norint gauti plazmą - kraujo dalį, kurią, be kitų medžiagų, sudaro baltymai.

Po elektroforezės galima vizualizuoti juostų modelį ir vėliau grafiką, kuriame nurodomas kiekvienos baltymų frakcijos kiekis, kuris yra pagrindinis diagnozės nustatymas.

Kam jis sukurtas: Baltymų elektroforezė leidžia gydytojui ištirti išsėtinės mielomos, dehidratacijos, cirozės, uždegimo, kepenų ligų, pankreatito, vilkligės ir hipertenzijos atsiradimą pagal juostos schemą ir grafiką, pateiktą tyrimo ataskaitoje.

Suprasti, kaip tai daroma, ir kaip suprasti baltymų elektroforezės rezultatą.